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液相色譜柱如何進行保養?

更新時間:2017-01-16      瀏覽次數:2462
    
  液相色譜(HPLC)是20世紀60年代后期發展起來的分離分析技術,是現代分離測定的重要手段。問世以來,因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、藥物及臨床分析。液相色譜柱是消耗品,會隨使用時間或進樣的次數增加,出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰,柱效下降。
  
  液相色譜柱的保養:
  
  色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。
  
  我們在對液相色譜使用前進行測試以后,我們要根據不同的情況對色譜柱進行保養:
  
  ①反相色譜柱每天實驗后的保養:使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
  
  ②長期保存色譜柱:如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑*或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度是室溫。
  
  
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